Monoclonal Anti-Rabies, FITC

Ablaufschema 

1. Vorbereitung
   Herstellung der Gebrauchsverdünnung von Monoclonal Anti-Rabies, FITC mit H2O dest. und PBS-Puffer.
2. Probe fixieren
   Probe auf Objektträger positionieren und zum Fixieren 3 x kurz durch nichtleuchtende Flamme eines Bunsenbrenners ziehen.
3. Überschichten
   Fixierte Proben mit der Gebrauchsverdünnung von Monoclonal Anti-Rabies, FITC überschichten.
4. Einwirken
   Objektträger 30 min in feuchter Kammer bei 37 °C aufbewahren.
5. Waschen
   Objektträger durch Eintauchen in PBS-Puffer 3 x je 5 min waschen.
6. Trocknung
   Objektträger mit Wasser abspülen und an der Luft trocknen lassen.
7. Ergebnis ablesen und auf Fluoreszenz prüfen
   Im Fluoreszenzmikroskop Probe auf Fluoreszenz untersuchen: Positive Probe zeigt eindeutig vom Gewebe differenzierbare, nahezu runde Partikel unterschiedlicher Größe mit intensiv gelbgrüner Fluoreszenz und mit meist randzonaler Verstärkung der Fluoreszenz. Gewebehintergrund darf nur eine schwache, graugrüne Fluoreszenz aufweisen.

Interpretation der Ergebnisse
Die Präparate werden unter einem Mikroskop mit geeigneter Fluoreszenzeinrichtung ggf. unter Verwendung der Ölimmersion betrachtet.

Positives Ergebnis
Positive Proben zeigen eindeutig vom Gewebe differenzierbare, nahezu runde Partikel unterschiedlicher Größe mit intensiv gelbgrüner Fluoreszenz, wobei häufig eine randzonale Verstärkung der Fluoreszenz zu beobachten ist. Der Gewebehintergrund darf nur eine schwache, graugrüne Fluoreszenz aufweisen.

Negatives Ergebnis
Das Fehlen von Partikeln mit intensiv gelb-grüner Fluoreszenz bei schwach graugrünem Hintergrund zeigt die Abwesenheit von Tollwutvirus an.